北京华越洋生物
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pAd-BLOCK-iT-DEST载体图谱

pAd-BLOCK-iT-DEST

pAd-BLOCK-iT-DEST

pAd-BLOCK-iT-DEST

 



编号

载体名称

北京华越洋VECT511136

pAd-BLOCK-iT-DEST

 

pAd-BLOCK-iT-DEST  Gateway载体基本信息:

载体名称:

pAd-BLOCK-iT-DEST

质粒类型:

RNAi载体;Gateway载体;腺病毒载体

高拷贝/低拷贝:

低拷贝

启动子:

U6

克隆方法:

Gateway

载体大小:

34864bp

5' 测序引物及序列:

5′-GACTTTGACCGTTTACGTGGAGAC-3′

3' 测序引物及序列:

5′-CCTTAAGCCACGCCCACACATTTC-3′

RNAi类型:

shRNA

载体抗性:

氨苄青霉素

筛选标记:

--

克隆菌株:

ccdB阳性筛选 DB3.1感受态细胞,
 
 
阴性筛选用 OmniMAX2-T1感受态细胞
 
 
重组腺病毒载体的复制扩增则最好使用 Stbl3感受态细胞,使用DH5a则常常会发生质粒拷贝数降低、小提提不出质粒、质粒大小改变等现象。
   

备注:

对应的入门载体是 pENTR/U6
 
 
腺病毒包装可以选用Invitrogen出品的293A包装细胞系,或者使用bj5183菌株。
   

稳定性:

稳表达

组成型:

组成型

病毒/非病毒:

腺病毒

 

pAd-BLOCK-iT-DEST载体质粒图谱和多克隆位点信息:

 

 

pAd-BLOCK-iT-DEST载体简介:

pAd-BLOCK-iT-DEST RNAi Gateway 载体

 (pAd-BLOCK-iT-DEST RNAi Gateway Vector) 可用于在体内高效导入和瞬时表达来自腺病毒载体的短发夹 RNA (shRNA) 新型克隆方法将约 50 bp DNA 寡核苷酸克隆到 BLOCK-iT-U6 入门载体中紧随 U6 polIII 启动子之后的位置。 将入门载体高效重组到 pAd-BLOCK-iT-DEST 载体后进行病毒制备和转导,随后 U6 启动子驱动的 shRNA 可在大多数分裂或非分裂哺乳动物细胞类型中瞬时表达。 生成的 shRNA 可避开宿主防御机制,将有效产生 RNAi 基因抑制反应。

 

pAd-BLOCK-iT-DEST 载体(图 1)提供:

• attR 位点环绕的无启动子区域,用于与侧翼序列为 attL 的包含RNAi 表达盒的 U6 Gateway入门载体或任何侧翼具有 attL 的启动子和基因序列进行高效重组

高效包装腺病毒和导入目的 shRNA 所需的所有组分。 使用这种载体,可对分裂和非分裂哺乳动物细胞以及动物模型中的基因抑制进行瞬时分析。

pAd-BLOCK-iT-DEST载体序列

pAd-BLOCK-iT-DEST其他相关Gateway载体:

pLKO-DEST-puro

pcDNA6.2/V5-PL-DEST

pLenti7.3-V5-DEST

pcDNA6.2/N-YFP-DEST

pLenti6-UbC-V5-DEST

pcDNA3.2/V5-DEST

pLenti4-V5-DEST

pAd/BLOCK-iT-DEST

pLenti4-BLOCK-iT     -DEST

pT-Rex-DEST30

pIB-V5-His-DEST

pLKO-DEST-EGFP

pET-DEST42

plenti6/V5-Dest

pENTR-MCS1-IRES2-EGFP

pLenti6-tdTomato-V5-DEST

pENTR-L5-pLac-Spec-L2

pLenti6/BLOCK-iT     -DEST

pENTR-GUS

pLenti6.4/R4R2/V5-DEST

pENTR-DsRed2-MCS1     miR

pLenti6.2/V5-DEST

pENTR221

pENTR-L1-pLac-lacZa-R5

pENTR3C-Dual

pENTR11-Dual

pENTR     H1 TO

pEXP4-DEST

pDONR222

pEXP3-DEST

pDONR221-P4RP3R

pENTR5'/EF1αp

pDONR     Zeo

pEXP2-DEST

pDest40

pENTR4-FLAG

pDEST24

pENTR4

pDEST22

pENTR2B

pDEST10

pEXP1-DEST

pcDNA-DEST53

pDONR-P2RP3

pcDNA6.2-N-EmGFP-DEST

pDONR221-P1P4

pAd-BLOCK-iT-DEST

pDONR221

pLKO-DEST-YFP

pDEST26

pLenti6.2/C-Lumio/V5-DEST

pDEST15

pLenti6/TR

pcDNA-DEST40

pLenti4/TO/V5-DEST

pcDNA6/BioEase-DEST

pLenti4/V5-GW/LacZ

pcDNA6.2/GW/EmGFP-miR     negative

pENTR-MCS1-IRES2-DsRed2

pcDNA6.2/C-EmGFP-DEST

pENTR-L5-LacI-L4

pAd/CMV/V5-DEST

pENTR-L1pLaclacZaL4

pT-Rex-DEST31

pENTR11-Dual

pMT-DEST48

pENTR5'/CMVp

pLKO-DEST-hygro

pENTR4-Dual

plenti-CMV-puro-DEST

pENTR1A

pLenti6-capTEV-CT-DEST

pEF-DEST51

pLenti6.3-V5-DEST

pDONR223

pENTR-R4-pLac-Spec-R3

pDONR221-P5P4

pENTR-GeneBLAzer

pDONR221-P5P2

pENTR5-UbCp

pDONR201

pENTR3C

pDEST20

pENTR     U6

pDEST17

pENTR     2B Dual

pDEST12.2

pEBNA-DEST

pDONR-P4P1R

pET301/CT-DEST

pDONR207

pET300/NT-DEST

pDEST27

pcDNA6.2/cGeneBLAzer-DEST

pDEST14

pCMV-SPORT6

pDEST8

pCMV-SPORT6

pcDNA-DEST47

pcDNA6.2/nGeneBLAzer-DEST

pcDNA6.2-V5-DEST

pcDNA6.2/C-YFP-DEST

pcDNA3.1-nV5-DEST

pcDNA6.2/cTC-Tag-DEST

pBAD-DEST49

pcDNA6.2/cLumio-DEST

pAd-PL-DEST

pcDNA6.2/nLumio-DEST

pMT/BioEase-DEST

pDEST32

pXINSECT-DEST38

pYES-DEST52

pXINSECT-DEST39