HB2151感受态细胞

HB2151感受态细胞

HB2151 Competent Cell（化学热激/电转电击）

HB2151大肠杆菌是主要用于制备可溶性单链抗体（single-chain variable fragment，scFv）的一种K-12系菌种。 

   HB2151感受态细胞它具有下列特点：1.可用于制备scFv，但不携带抑制基因。常用的另外一个用于scFv制备的菌种Tg1携带抑制基因。因此需要根据质粒或噬菌体载体选择宿主。2.可进行蓝白斑筛选。大肠杆菌HB2151菌种的基因型是：K12, F'[proAB lacIq lacZΔM15], ara, Δ(lac-pro), thi。此基因型信息来源于原始文献。

HB2151感受态细胞产品说明:  

HB2151感受态细胞是实验室最常用的感受态细胞，recA1和endA1的突变有利于DNA的稳定和高纯度质粒DNA的提取。  

HB2151感受态细胞操作方法:  

1.取100ul冰上融化的HB2151感受态细胞，加入目的DNA（质粒或连接产物）并轻轻混匀，冰上静置25分钟。  

2.42℃水浴热激45秒，迅速放回冰上并静置2分钟，晃动会降低转化效率。  

3.向离心管中加入700ul不含抗生素的无菌培养基（2YT或LB），混匀后37℃，200rpm复苏60分钟。  

4.5000rpm离心一分钟收菌，留取100ul左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。  

5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。  

HB2151感受态细胞注意事项:  

1.感受态细胞最好在冰上融化。  

2.混入质粒或连接产物时应轻柔操作。  

3.转化高浓度的质粒或高效率的连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。