北京华越洋生物
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pGAPZB

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编号

载体名称

北京华越洋VECT75528

pGAPZB

 

pGAPZB载体基本信息:

启动子:

GAP

复制子:

pUC ori

终止子:

AOX1 TT

质粒分类:

酵母系列,毕赤酵母表达载体

质粒大小:

2882bp

质粒标签:

C-Myc, C-His

原核抗性:

Zeo

克隆菌株:

DH5α

培养条件:

37℃,有氧 LB

表达宿主:

酵母细胞

诱导方式:

不需诱导

5'测序引物:

pGAP-F:GTCCCTATTTCAATCAATTGAA

3'测序引物:

AOX3:GGCAAATGGCATTCTGACAT

 

pGAPZB载体图谱:


pGAPZB载体简介:

   甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)的酶在许多生物细胞中包括毕赤酵母,稳定高水平表达。最近,GAPDH蛋白编码基因启动子(GAP)被深入研究,并在毕赤酵母中能够高水表达重组蛋白,这取决于使用的碳源(Waterham等人,,1997)。GAP启动子(PGAP)的重组蛋白表达水平略高于AOX1启动子。
   pGAPZ A,B,和C载体(2.9 KB)和pGAPZα,B,和C(3.1 KB)载体使用GAP启动子在毕赤酵母中稳定表达重组蛋白。重组蛋白表达为为带有C-末端myc抗原表位和C端His标签的融合蛋白。此外,pGAPZα表达的融合蛋白在N-端带有酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)的α-因子分泌信号肽。这两个系列的载体都提供三个不同读码框的载体,以方便克隆的带有C-端标签和/或N-末端分泌信号肽的载体中。这些载体是基于显性选择标记,Zeocin(博莱霉素)的筛选标记可以同时使用于毕赤酵母和大肠杆菌。

 

pGAPZB载体序列:

ORIGIN

        1 agatcttttt tgtagaaatg tcttggtgtc ctcgtccaat caggtagcca tctctgaaat

       61 atctggctcc gttgcaactc cgaacgacct gctggcaacg taaaattctc cggggtaaaa

      121 cttaaatgtg gagtaatgga accagaaacg tctcttccct tctctctcct tccaccgccc

      181 gttaccgtcc ctaggaaatt ttactctgct ggagagcttc ttctacggcc cccttgcagc

      241 aatgctcttc ccagcattac gttgcgggta aaacggaggt cgtgtacccg acctagcagc

      301 ccagggatgg aaaagtcccg gccgtcgctg gcaataatag cgggcggacg catgtcatga

      361 gattattgga aaccaccaga atcgaatata aaaggcgaac acctttccca attttggttt

      421 ctcctgaccc aaagacttta aatttaattt atttgtccct atttcaatca attgaacaac

      481 tatttcgaaa cgaggaattc acgtggccca gccggccgtc tcggatcggt acctcgagcc

      541 gcggcggccg ccagctttct agaacaaaaa ctcatctcag aagaggatct gaatagcgcc

      601 gtcgaccatc atcatcatca tcattgagtt ttagccttag acatgactgt tcctcagttc

      661 aagttgggca cttacgagaa gaccggtctt gctagattct aatcaagagg atgtcagaat

      721 gccatttgcc tgagagatgc aggcttcatt tttgatactt ttttatttgt aacctatata

      781 gtataggatt ttttttgtca ttttgtttct tctcgtacga gcttgctcct gatcagccta

      841 tctcgcagct gatgaatatc ttgtggtagg ggtttgggaa aatcattcga gtttgatgtt

      901 tttcttggta tttcccactc ctcttcagag tacagaagat taagtgagac cttcgtttgt

      961 gcggatcccc cacacaccat agcttcaaaa tgtttctact ccttttttac tcttccagat

     1021 tttctcggac tccgcgcatc gccgtaccac ttcaaaacac ccaagcacag catactaaat

     1081 tttccctctt tcttcctcta gggtgtcgtt aattacccgt actaaaggtt tggaaaagaa

     1141 aaaagagacc gcctcgtttc tttttcttcg tcgaaaaagg caataaaaat ttttatcacg

     1201 tttctttttc ttgaaatttt tttttttagt ttttttctct ttcagtgacc tccattgata

     1261 tttaagttaa taaacggtct tcaatttctc aagtttcagt ttcatttttc ttgttctatt

     1321 acaacttttt ttacttcttg ttcattagaa agaaagcata gcaatctaat ctaagggcgg

     1381 tgttgacaat taatcatcgg catagtatat cggcatagta taatacgaca aggtgaggaa

     1441 ctaaaccatg gccaagttga ccagtgccgt tccggtgctc accgcgcgcg acgtcgccgg

     1501 agcggtcgag ttctggaccg accggctcgg gttctcccgg gacttcgtgg aggacgactt

     1561 cgccggtgtg gtccgggacg acgtgaccct gttcatcagc gcggtccagg accaggtggt

     1621 gccggacaac accctggcct gggtgtgggt gcgcggcctg gacgagctgt acgccgagtg

     1681 gtcggaggtc gtgtccacga acttccggga cgcctccggg ccggccatga ccgagatcgg

     1741 cgagcagccg tgggggcggg agttcgccct gcgcgacccg gccggcaact gcgtgcactt

     1801 cgtggccgag gagcaggact gacacgtccg acggcggccc acgggtccca ggcctcggag

     1861 atccgtcccc cttttccttt gtcgatatca tgtaattagt tatgtcacgc ttacattcac

     1921 gccctccccc cacatccgct ctaaccgaaa aggaaggagt tagacaacct gaagtctagg

     1981 tccctattta tttttttata gttatgttag tattaagaac gttatttata tttcaaattt

     2041 ttcttttttt tctgtacaga cgcgtgtacg catgtaacat tatactgaaa accttgcttg

     2101 agaaggtttt gggacgctcg aaggctttaa tttgcaagct ggagaccaac atgtgagcaa

     2161 aaggccagca aaaggccagg aaccgtaaaa aggccgcgtt gctggcgttt ttccataggc

     2221 tccgcccccc tgacgagcat cacaaaaatc gacgctcaag tcagaggtgg cgaaacccga

     2281 caggactata aagataccag gcgtttcccc ctggaagctc cctcgtgcgc tctcctgttc

     2341 cgaccctgcc gcttaccgga tacctgtccg cctttctccc ttcgggaagc gtggcgcttt

     2401 ctcaatgctc acgctgtagg tatctcagtt cggtgtaggt cgttcgctcc aagctgggct

     2461 gtgtgcacga accccccgtt cagcccgacc gctgcgcctt atccggtaac tatcgtcttg

     2521 agtccaaccc ggtaagacac gacttatcgc cactggcagc agccactggt aacaggatta

     2581 gcagagcgag gtatgtaggc ggtgctacag agttcttgaa gtggtggcct aactacggct

     2641 acactagaag gacagtattt ggtatctgcg ctctgctgaa gccagttacc ttcggaaaaa

     2701 gagttggtag ctcttgatcc ggcaaacaaa ccaccgctgg tagcggtggt ttttttgttt

     2761 gcaagcagca gattacgcgc agaaaaaaag gatctcaaga agatcctttg atcttttcta

     2821 cggggtctga cgctcagtgg aacgaaaact cacgttaagg gattttggtc atgcatgaga

     2881 tc

//

 

 

pGAPZB载体其他相关的毕赤酵母过表达载体:

pYM39-EYFP
pYM33-EBFP
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pPICZαC
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