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细菌膜蛋白质微量提取试剂盒

细菌膜蛋白质微量提取试剂盒

细菌膜蛋白质微量提取试剂盒

Bacterial Membrane Protein Miniprep Kit

 

产品货号:huayueyang452         产品规格:50次

本产品仅可用于解研实验,严禁用于其他非科研用连

细菌膜蛋白质微量提取试剂盒 

本试剂这是基于超迷离心的快速提取细菌模蛋白的试剂合。其原理是裂解细胞后,通过超速离心分离出细构映和附着的蛋白

细菌膜蛋白质微量提取试剂盒

产品特点:

1.一步式分高细胞咬和咬蛋白,密度福度离心法简单快续。

2.腰蛋白纯度高,能够去除备种胞浆蛋白的污染,也能去除松散附着在细胞膜上的蛋白,所得膜蛋白主要是整合蛋白。

3、膜蛋白完整性好,主要是由于实际中有抑制蛋白酶成分。

4.回收效李亮,一起的得到相当于总蛋白菜6%的噬蛋白。

5.可用于Ecoli,Shphimurium,K.serogersP.aeruginosa,C.crescentus等细茵

·耗材 ·培养基 ·ELISA试剂盒 >毒素细菌病毒检测

细菌膜蛋白质微量提取试剂盒

试剂盒组成:

成分

规格

溶液A

125ml

溶液B

25ml

溶液C

250m

DNasel干粉

3.5mg

说明书

1份

 

储存条件:低温坛输和保存,DNae!更要低遇保存,有效期一年

 

地用方法:

准备:第一次使用本试剂意时需要将所有DNaseI干粉倒入溶液B中,轻柔颠倒使DNase干粉略解。未用完的部分需要放-20C保存,最好在一个月内完,否则DNase 将逐渐失去活性。此外,最好在实验苗1小时将溶液B冰浴预冷。

用法一:电量制备(丰要用干上程量出特小的SDS-PAGE电建装索验)

1.收集20-40mL 过夜培养的维菌购和培养被0D420在1.5左右即可1,2500g率温惠小10分钟后弃上清

2.加入2rmL溶液A,轻柔吹打,将细茵重悬于溶液A中。3,2500q室温离心10分钟后弃上清。

4.加入0.5mL油液B|必须已经提前加入了DNase干粉),轻柔吹打使细菌重量。注:如果地菌起始量没有20-40mL,溶液A的用量可以等比例降低。重县在溶装A中的细菌可以放-80℃长期保存。

5、用超声或French Press方法警解维胞。如果用French Press方法,则需要处理至少两次,每次的压力为9.65x10E7(=14000 psi)。注意:不论用哪种裂解方法,都必须在显微镜下检查地菌是否已经裂解。否则还需要重复细菌餐解过程,直到80%以上的细茴都裂解为止,

6.2600g室温满心8分钟后小心转移上清到新的10mL-15mL塑料离心营中|如Beckman Optima台式超述离心机离心管),弃沉定(未破裂细画)。

7。在上清(细苗制船液|中加入5mL预冷的溶液C,轻柔颜例温匀后冰落放置30-60分钟。其间可以轻染颜倒混匀3-5次。

8.用 Bechman Cptima 台式超速需心机115000g4℃离心60分钟。也可以使用其他冷冻超速离心机,但离心力应该一致,否则有可能得不到沉淀。

9、小心称忘上请,在沉淀中加入0.2mL溶法A,充分吹打混句。

10.用Beckman Optima 台式超速离心机 115000g4C离心60分钟。也可以使用其他冷东超速离心机,但康心力应该一致,否则右可的得不到沉定。

11、小心将弃上清,所得深注放-20*℃长期保存,也可以真接加入0.1mL白备的,跟后继实验兼容的缓冲液(加1xSDS-PAGE上样液中,可从本公司购买!,所得睡蛋白的浓度将在1ma'mL左右。

用法二:大量制备(主要用于上样量比较大的2D电泳等实验)

1,收集200-400mL过夜培养的细苗馆和培养液(QD420在1.5左右即可),2500g室四商心10分钟后弃上清

2.加入20mL溶油A,轻柔吹打,寄细菌重悬于溶液A中。3,25000室温离心10分钟后弃上清。

4.加入5mL溶液刚必须已经提的加入了DNase l千粉),轻柔吹打使细菌重悬。注:如果细菌起始量没有200-400mL,消波A的用量可以等比例降低。重悬在溶波A中的细菌可以放-80℃长期保存。

5、用超声或French Press方法装解细胞。如果用French Prees方法,则需要处理至少两次,每次的压力为9.65x10E7(=14000 cs)、注意:不论用吃种裂解方法,都必须在罪待钟下检查旧菌是否已经裂解,否则还需要重复细菌务解过程,真到80%以上的细茵都製解为止。

6.2500g室温离心8分钟后小心转移上清到干净的玻璃烧杯中,弃记定(未破星细胞).

7.在上请(细菌裂解液|中加入50mL预冷的溶液C,轻轻在冰浴中提拌混匀30-60分钟。注:可以在大烧杯中装冰,然后将装有样品的小烧杯放入,在成入干净的提拌子,以最低速度提拌。

8.用 Beckman Type 55.2 Ti转头 115000g 4C离心60分钟,也可以使用其他冷冻超速离心机,但需心力应该一致9,小的称在上请,在沉定中加入2mL简液品,充分应打得匀,

10,用Beckman Tvpe 55.2 T精头 115000g4C商心60分钟。也可以使用其他冷东超速商心机,但应心力应该一致。

11.小心将弃上清,所得深注放-20*C长期保存或溶解车imL自备的,眼后接客哈兼容的国冲港(t1x等电点申法上样液。可从本公司购买),所得膜蛋白的浓度在imgimL左右。

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