BL21-(AI)感受态细胞

BL21-(AI)Competent Cell


 

编号

名称

规格

单位

北京华越洋WR4481

BL21-AI感受态细胞

20×100ul

北京华越洋WR4481

BL21-AI感受态细胞

20×100ul

 

BL21-AI感受态细胞基本信息

 

BL21-AI基因型: 

BL21-AI感受态细胞菌株基因型 

 

菌株类型:

E.coli

 

培养基:

LB培养基

 

生长条件:

37 , 有氧

 

抗性:

四环素

 

应用:

蛋白表达, 毒性蛋白表达

 

质粒转化条件:

 42 热激

 

诱导方法:

L-阿拉伯糖

 

菌株特点: 

  1. 来源于BL21菌株。

  2. 是大肠杆菌B/r型菌株(E.coli B/r),在araBAD操纵子的araB位点含有T7 RNA聚合酶基因,T7 RNA聚合酶基因的表达可以通过阿拉伯糖或者葡萄糖来调节,但菌株不含有lon蛋白酶。

  3. 菌株的最大蛋白表达量往往低于BL21(DE3).

  4. BL21-AI是膜外蛋白酶OMPT的缺陷型菌株。该酶的缺失能够有效防止表达的异源目的蛋白在细菌体内的降解。

  5. Brian Caliendo (Voigt 实验室)报道过pCP20质粒比较难于转化到这个感受态细胞中,而pCP20转化到其他菌株中都很正常,但是菌体原因未知。

  6. 使用L-阿拉伯糖诱导araBAD启动子下游的蛋白表达。使用葡萄糖可以抑制araBAD启动子下游的蛋白表达。注意:即使不加葡萄糖,BL21AI细胞的araBAD启动子下游的本底蛋白表达水平仍然很低,加入葡萄糖后能够进一步的降低本底蛋白的表达水平。

  7. BL21-AI感受态细胞适用于任何以T7启动子为基础的表达载体,能够进行高水平的重组蛋白表达。

  8. 因为菌株体内的T7 RNA聚合酶水平能够进行有效调节,BL21-AI感受态细胞能够有效表达对其他BL21细胞有毒或生长抑制的蛋白。从BL21-AI菌株中获得目的重组蛋白产量,和其他BL21菌株产量相当。

  9. 建议选择该菌株进行蛋白表达的条件如下:1. 你 在使用T7启动子载体(高拷贝或者低拷贝都可以)进行蛋白表达。2.使用其他BL21进行蛋白表达时,你观察到明显的细菌生长的抑制作用。3.你在表达一个已知的毒性蛋白。

 

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