ER2566感受态细胞




编号

名称

规格

单位

WR26-100S

ER2566感受态细胞

10*100ul

         WR26-100

ER2566感受态细胞

20*100ul

ER2566感受态细胞

ER2566 Chemically Competent Cell 产品说明书


ER2566感受态细胞产品规格

ER2566:                          10*100ul

pUC19(control vector):  10pg/ul            10ul

保存条件:-80


ER2566感受态细胞基因型

F- λ- fhuA2 [lon] ompT lacZ::T7 gene1 gal sulA11 Δ(mcrC-mrr)114::IS10 R(mcr-73::miniTn10-TetS)2 R(zgb-210::Tn10)(TetS) endA1 [dcm]


ER2566感受态细胞产品说明

北京华越洋ER2566感受态细胞为lon ompT蛋白酶缺陷菌株。膜外蛋白酶OMPT的缺失能够有效防止表达的异源目的蛋白在细菌体内的降解。High5TM系列 ER2566感受态细胞采用特殊化学试剂制作,可用于DNA的化学转化,经pUC19质粒检测转化效率达108cfu/ug


ER2566感受态细胞操作方法

1. 取100μl冰上融化的ER2566感受态细胞,加入目的质粒并轻轻混匀,冰上静置25分钟。

2. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。

3. 向离心管中加入700μl不含抗生素的无菌培养基(2YT或LB),混匀后37℃,200rpm复苏60分钟。

4.  5000rpm离心一分钟收菌,留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。

5. 将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。

 


ER2566感受态细胞注意事项

1. 感受态细胞最好在冰上融化。

2. 混入质粒时应轻柔操作。

3. 转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。

4. 诱导时,IPTG浓度可选(0.1-2mM均可)

5. 为获得需要量的蛋白,最佳诱导时间,温度,IPTG浓度需实验者优化。



 

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