C41(DE3), C41(DE3)PlysS感受态细胞

C41(DE3), C41(DE3)PlysS Competent Cell




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北京华越洋2HU820

C41(DE3)感受态细胞

-80℃, 六个月

1pcs, 100ul/

北京华越洋2HU821

C41(DE3)PlysS感受态细胞

-80℃, 六个月

1pcs, 100ul/


感受态细胞名称:      C41(DE3)

菌株类型:            E.coli

培养基:              LB培养基

生长条件:            37 ,  有氧

基因型:              C41(DE3)感受态细胞基因型

抗性:                无抗

质粒转化条件:        42 ℃热激

应用:                蛋白表达

诱导方法:            IPTG


菌株特点:      

通过表达C41(DE3), C41(DE3) pLysS, C43(DE3), and C43(DE3) pLysS感受态细胞宿主菌能够有效表达来源于各个物种包括细菌,酵母,植物,病毒和动物等多个物种的有毒蛋白。

该系列宿主菌基因中含有突变,可以包容有毒蛋白的表达。C41(DE3)来源于BL21(DE3)。该宿主菌含有一个基因突变,能够降低T7 RNAP的酶活力,所以能够阻止过表达重组表达有毒蛋白的细胞死亡。

正如标准的BL21(DE3)菌株,过表达菌株C41(DE3), C41(DE3)pLysS, C43(DE3), C43(DE3)pLysS是λDE3的溶源性菌株。这些菌株在lacUV5启动子的下游含有一个T7 RNA聚合酶基因。这些宿主菌适合于表达克隆于T7启动子表达载体上的基因。过表达菌株C41(DE3), C41(DE3)pLysS, C43(DE3), C43(DE3)pLysSlonompT蛋白酶的缺陷上是不同的。

请注意的是,该过表达系列宿主菌的蛋白表达量与BL21(DE3)相比要稍低。

 

C41(DE3)PlysS感受态细胞

基因组:F–ompT hsdSB (rB-  mB-) gal dcm (DE3) plysS(CmR)


产品简介

C41(DE3) PlysS菌株能有效表达来源于各个物种包括细菌酵母,植物,病毒和动物等多个物种的有毒蛋白,这是因为该菌的基因存在突变,可以包容有毒蛋白的表达。C41(DE3) PlysS来源于BL21(DE3),含有一个基因突变,能够降低T7RNAP的酶活力,所以能够阻止表达有毒蛋白细胞的死亡。正如标准的BL21(DE3)菌株C41(DE3) PlysS是λDE3的溶源性菌株,它在lacUV5启动子额下游含有T7RNA聚合酶基因,适合表达克隆于T7启动子表达载体上的基因。C41(DE3) PlysS携带有一个氯霉素抗性质粒,该质粒能够表达少量的T7溶菌酶。这个酶是T7RNA聚合酶的天然抑制剂。这些宿主菌能够有效抑制T7RNA聚合酶在诱导剂诱导前的表达水平,所以能够稳定菌株去编码特定的独立蛋白。在培养细菌的过程中,应该加入34 µg/mL的氯霉素来维持pLysS质粒的存在。但是,C41(DE3) PlysS存在IonompT蛋白酶的缺陷,而且蛋白表达量比BL21(DE3)稍低。


操作说明:

1,收到本产品请直接冻存于-80℃冰箱备用。

2,取冻存于-80度冰箱的10μl感受态细胞于冰上融化。

3,加入1μl纯质粒或10ul连接产物,轻轻吹打混匀,冰浴30分钟

4,将菌液放入42℃水浴中热激90秒,立即放入冰浴中5 分钟

5,加入800ul LB,于37℃恒温摇床上rpm;45分钟温育。

6,将菌液4000rpm离心3分钟收菌,留200μl上清将菌体打散,均匀涂布于含适当浓度的相应抗生素的琼脂平板表面,平板于37℃可先正放置1h,待液体吸收完毕,再倒置培养过夜。

注:

①:新倒的平板可于37℃培养箱中预先放置至干燥。

②:当转化的是TA克隆连接产物时可在菌液中加入8μl1M IPTG40μl 20mg/ml X-gal以进行蓝白斑筛选。

 


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