DiI(细胞膜红色荧光探针)




       编码

 品名

规格


北京华越洋生物GX542-10mg


DiI(细胞膜红色荧光探针)

10mg

北京华越洋生物GX542-100mg

DiI(细胞膜红色荧光探针)

100mg


DiI是一种亲脂性的荧光染料,可以用来染细胞膜和其它脂溶性生物结构,进入细胞膜后,DiI在整个细胞膜上扩散,最佳浓度时可以使整个细胞膜染色。DiI在进入细胞膜之前荧光非常弱,当与细胞膜结合后其荧光强度大大增强,DiI被激发后可以发出橙红色的荧光,具有很高的淬灭常数和激发态寿命。可以用标准的 TRITC滤光片检测。


DiI通常不会明显影响细胞的生存力(viability),因此被广泛用于正向或逆向的,活的或固定的神经等细胞或组织的示踪剂或长期示踪剂(long-term tracer)。除了最简单的细胞膜荧光标记外,还可以用于检测细胞的融合和粘附,检测发育或移植过程中细胞迁移,通过FRAP(Fluorescence Recovery After Photobleaching)检测脂在细胞膜上的扩散,检测细胞毒性和标记脂蛋白等。

 

产品性质

同义名

DiIC18(3)DiI perchlorate

Cas No.

41085-99-8

分子式

C59H97ClN2O4

分子量

933.87

Ex/Em

549/565 nm

推荐滤光器

XF23-Omega, 31001-Chroma


运输与保存方法

冰袋(wet ice)运输。产品-20 ℃干燥避光保存,有效期一年。


使用方法

1. 染色液制备

1)配置DMSOEtOH 储存液:储存液用 DMSOEtOH配置浓度15 mM

注意:未使用的储存液保存在-20℃,分装保存,避免反复冻融。

2)工作液制备:用合适的缓冲液(如:无血清培养基,HBSSPBS)稀释储存液,配制浓度为15 μM的工作液。

注意:工作液最终浓度是根据不同细胞和实验的经验来配制。可从推荐浓度的十倍以上找最佳条件。

2. 悬浮细胞染色

1)悬浮细胞密度为 1 × 106/mL加入到工作液中。

2)在37 培养细胞 220分钟,不同的细胞最佳培养时间不同。

3)染色细胞试管在10001500转离心5分钟。

4)倾倒上清液,再次缓慢加入预温37的培养液。

5)重复(3),(4)步骤两次以上。

3. 粘壁细胞的染色

1)使粘壁的细胞在无菌实验室培养。

2)从培养基中移走盖玻片,吸走过量培养液,将盖玻片放在潮湿的环境中。

3)在盖玻片的一角加入100μL的染料工作液,轻轻晃动使染料均匀覆盖所有细胞。

4)在37 培养细胞 220分钟,不同的细胞最佳培养时间不同。

5)吸干染料工作液,用培养液洗盖玻片23次,每次用预温的培养基覆盖所有细胞,培养510分钟,然后吸干培养基。

4. 显微镜检测

1DiDDiODiIDiRDiS滤光器的选择参见表1

2)多色染料的同时检测,滤光器按照以下设定:

a) DiIDiOOmega XF52Chroma 51004

b) DiIDiDOmega XF92Chroma 51007

c) DiIDiODiDOmega XF93Chroma 61005

5. 流式细胞仪检测

染色的细胞可以分别用经典的FL1FL2FL3FL4流式细胞仪检测。


注意事项

1)         荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。

2)         为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。


 

 

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