普鲁士蓝染色试剂盒

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普鲁士蓝染色试剂盒

GT355

2*50m

规格:2*50ml 

有效期:12个月

 

产品简介:     

含铁血黄素(Hemosiderin)是一种血红蛋白源性色素,为金黄色或棕黄色颗粒,因其含铁、金黄色,故称为含铁血黄素。当红细胞被巨噬细胞吞噬后,在溶酶体酶的作用下,血红蛋白被分解为不含铁的橙色血质和含铁的含铁血黄素。

Perls普鲁士蓝反应(Prussian blue reaction)又称为含铁血黄素染色,Perls 普鲁士蓝是非常经典的组织化学反应,是显示组织内三价铁的一种敏感、传统优良的方法,其三价铁的亚铁氰化物是一种很稳定的化合物,在反应后可用红色染色剂进行复染,如核固红、伊红、中性红等。

Perls stain常用于显示局部组织内各种出血性病变,常见于吞噬细胞内。在判断含铁血黄素沉积时,用 Perls 反应可以得到证实,该染色方法可以很好的区分含铁血黄素和其他色素。该染色液稳定性好、可以长期保存、不易产生沉淀、应用范围广、可以进行复染。普鲁士蓝染色试剂盒(Perls stain,伊红法),其复染液采用伊红染色液,也是常用的复染液,该复染液染色时间较核固红染色液要短。


自备材料: 

1、10%的中性福尔马林

2、系列乙醇 

3、蒸馏水 

4、4%的多聚甲醛

 

操作步骤(仅供参考): 

(一)石蜡切片染色

1、 切片脱蜡至水 

① 二甲苯()                         510min

 ② 二甲苯()                         510min 

 ③无水乙醇()(可选)                35min

 ④无水乙醇()(可选)                35min 

 ⑤95%的乙醇                          35min 

 ⑥90%的乙醇                          35min

 ⑦80%的乙醇                          35min 

 ⑧自来水或蒸馏水冲洗()              13min 

 ⑨自来水或蒸馏水冲洗()              13min

  2、染色 

①切片入Perls stain(见注意事项6)     1530min 

 ②蒸馏水充分冲洗                      510min 

 ③伊红染色液淡染细胞核                1530s

 ④自来水冲洗                          15s

  3、脱水、透明、封固 

90%乙醇                             1020s 

 ②95%乙醇()                          12min 

 ③95%乙醇()                          12min

 ④ 无水乙醇()                         23min 

 ⑤无水乙醇()                          23min

 ⑥ 二甲苯()                           23min 

 ⑦二甲苯()                            23min 

 ⑧ 二甲苯()                          23min

 ⑨中性树脂封片。 

(二)冰冻切片染色  

1、 无需脱蜡,直接迅速用蒸馏水冲洗23min。 

2、 染色、脱蜡、透明、封固步骤同石蜡切片的染色步骤。

 (三 )细胞染色 

1、4%多聚甲醛固定1020min

2、自来水冲洗2次,每次2min

3、蒸馏水冲洗2次,每次2min

4、染色、脱蜡、透明、封固步骤同石蜡切片的染色步骤 

普鲁士蓝染色试剂盒  

染⾊结果: 

含铁血黄素或三价铁   蓝色

 细胞核、其他组织     红色

 

阴性对照(可选)

 取相同连续切片脱蜡至水。置于5%的草酸中,孵育2-6h后,经Perla stain,需要步骤

 同上。结果为阴性。

 

注意事项:     

1、 切片脱蜡应尽量干净。

2、 组织固定常采用10%的中性福尔马林,经普通福尔马林长期固定后,组织会有损伤。

3、 临用前取A1A2液等量混合,即为试剂(A),现配现用,不可提前配制。

4、整个操作过程中容器要干净,避免使用金属铁制品,洗切片和容器时以蒸馏水为宜,因

 普通水内含铁质。

5、避免使用酸性固定剂,铬酸盐处理也会妨碍铁的保存。

6、Perls stain染色时,应根据样品情况调整着色时间。

7、 所有检查切片都应使用同一个阳性对照切片,选择适合的对照非常重要.尸检肺组织是一

 个很好的对照,包含相当数量的铁阳性巨噬细胞(心衰细胞).

8、95%乙醇、90%乙醇应经常更换新液.

9、 冰冻切片和细胞的染色,应根据具体情况摸索实验条件.

10、 为了您的健康和安全,请穿实验服并戴一次性手套操作 

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2%   TTC染色液100ml苏木素伊红(HE)染色液2*100ml
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