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BL21(DE3)感受态细胞

BL21(DE3)感受态细胞

BL21(DE3)感受态细胞

 产品编码

 产品名称

 规格 价格

  WR105-100S

 BL21(DE3)感受态细胞

 10*100ul 290元

WR105-100

  BL21(DE3)感受态细胞

 20*100ul 420元


BL21(DE3)感受态细胞简介

北京华越洋生物的BL21(DE3)感受态细胞是采用大肠杆菌BL21(DE3)菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞,可用于DNA的化学转化。使用pUC19质粒检测,转化效率可达107,-70℃保存几个月转  化效率不发生改变。

   BL21(DE3)菌株适合表达非毒性蛋白。该菌株是以T7 RNA 聚合酶为表达系统的外源基因蛋白高效表达的宿主。T7 噬菌体RNA 聚合酶基因的表达受λ噬菌体DE3区的lacUV5 启动子调控,该区整合在BL21 染色体上。本产品是大肠杆菌BL21(DE3)菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞,可用于DNA的热击转化。使用pU19持粒检测,转化效率可达107

 

 

产品特点
转化效率可达107
可用于非毒性蛋白表达。
长时间保存于-80 ℃,转化效率不发生改变。

 

BL21(DE3)感受态细胞基因型:

F-ompT hsdSB(rBmB)gal dcm(DE3) 

 

BL21(DE3)感受态细胞产品说明:

BL21DE3)感受态细胞用于高效表达克隆于含有噬菌体T7启动子的表达载体(pET系列)的基因。λ噬菌体DE3区含有T7噬菌体RNA聚合酶,该区整合于BL21的染色体上,所以称为BL21(DE3)。可同时表达T7 RNA聚合酶和大肠杆菌RNA聚合酶,用于pET系列,pGEXpMAL等质粒的蛋白表达。BL21DE3)感受态细胞由特殊工艺制作,经pUC19质粒检测转化效率达107cfu/μg

 

BL21(DE3)感受态细胞操作方法:

  1. 100μl冰上融化的BL21DE3)感受态细胞,加入目的质粒并轻轻混匀,冰上静置25分钟。
  2. 42水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。
  3. 向离心管中加入700μl不含抗生素的无菌培养基(2YTLB),混匀后37200rpm复苏60分钟。
  4. 5000rpm离心一分钟收菌,留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YTLB培养基上。
  5. 将平板倒置放于37培养箱过夜培养。 

 

BL21(DE3)感受态细胞注意事项:

1. 感受态细胞最好在冰上融化。

2. 混入质粒时应轻柔操作。

3. 转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。

4. 诱导时,IPTG浓度可选(0.1-2mM均可)。

5. 为获得需要量的蛋白,最佳诱导时间,温度,IPTG浓度需实验者优化。

BL21(DE3)感受态细胞

 

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